Luigi Mangione, som misstänks ha mördat försäkringsbolaget United Healthcares vd Brian Thompson, förklarade sig "icke skyldig" när han ställdes inför en federal domstol på Manhattan på fredagen.
26-åringen har sedan tidigare nekat till mordanklagelserna som riktats mot honom på delstatsnivå, en process som pågår parallellt med det federala åtalet.
Åklagarmyndigheten har uppgett att man kommer att kräva att han döms till döden. Det är första gången som justitiedepartementet driver ett mål med krav på dödsstraff sedan Donald Trump blev president igen.
Ett av Trumps vallöften var att återuppta de federala avrättningarna efter det att de pausats av den tidigare presidenten Joe Biden.
Mordet på Brian Thompson utanför ett hotell på Manhattan i början av december förra året väckte stor uppmärksamhet.
Mangione lyckades fly och tog sig till Pennsylvania, där han av en slump upptäcktes av polis och greps på en McDonalds-restaurang i staden Altoona.
